间质干细胞的表面抗原

通过流式细胞仪分析

，间充质干细胞特异性表面抗原有
：SH2、SH3、 CD29

、CD44
、CD71
、CD90
、CD106
、CD120a
、CD124
。

BMSC：是骨髓中除HSC 以外的非造血性干细胞

，骨髓中绝大多数是HSC
，BMSC 只占骨髓有核细胞的0.001%～0.01% 。因此鉴定BMSC 的方法是在骨髓的干细胞中排除HSC——BMSC：CD45-、CD34-、CD29+、 CD14+/ HSC


：CD34+
。

间质干细胞的培养原理概述

间质干细胞（mesenchymal stem cell
，MSC）是一群中胚层来源的具有自我更新和多向分化潜能的多能干细胞
，在适宜的培养条件下可分化成多种组织细胞


，包括成骨细胞



、软骨细胞
、肌肉细胞


、脂肪细胞等

。

间质干细胞最早是从骨髓中分离得到的，正常情况下，它在骨髓中的比例非常低，仅占单核细胞的1/105 ~1/104 。骨髓中单个核细胞包括淋巴细胞和单核细胞，其体积、形态和密度与其他细胞不同

，红细胞和多核白细胞密度较大


，为1.090 g/ml左右




，而淋巴细胞和单核细胞密度为1.075~1.090 g/ml

，血小板为1.030~1.035 g/ml。为此利用一种密度介于1.075~1.092 g/ml之间而近于等渗的溶液（分层液）进行密度梯度离心
，使一定密度的细胞按相应密度梯度分布
，从而将各种血细胞加以分离。常用的分层液有Ficoll和Percoll两种。

在骨髓的原代培养物中，除了贴壁生长的成纤维细胞样的间质干细胞外
，还混杂着一些巨噬细胞


、单核细胞


、造血细胞及红细胞等，要得到较均一的间质干细胞，必须除去其他细胞。根据其他细胞的特性

，可采用不同的方式排除它们。对于红细胞，因其不贴壁
，可通过换液除去

。对于贴壁的单核巨噬细胞



，可根据其黏附能力的不同，通过调整Trypsin/EDTA 的消化时间，保证间质干细胞在短暂的作用时间内与塑料培养瓶壁分离
，而巨噬细胞
、单核细胞




、造血细胞等仍贴附于培养瓶壁


，从而使间质干细胞与其他的贴壁细胞得到分离

。

在传代培养中，接种密度是影响体外培养间质干细胞增殖潜能的重要因素。低密度接种时
，间质干细胞的增殖能力明显提高
，而诱导细胞分化时则需要较高的细胞密度

，这可能与分化时细胞与细胞间的相互作用有关
。而在培养过程中

，若细胞过度融合会促进其分化趋向



，故要保持干细胞未分化状态，要及时传代

。