实验人员的无菌准备

：
1.肥皂洗手
。
2.穿好隔离衣、带好隔离帽

、口罩、放好拖鞋
3.用75％酒精棉球擦净双手

。

无菌操作的演示

：
1.凡是带入超净工作台内的酒精
、PBS、培养基

、胰蛋白酶的瓶子均要用75％酒精擦拭瓶子的外表面
2.靠近酒精灯火焰操作

。
3.器皿使用前必须过火灭菌
4.继续使用的器皿（如瓶盖

、滴管）要放在高处
，使用时仍要过火

。
5.各种操作要靠近酒精灯




，动作要轻
、准确


，不能乱碰







。如吸管不能碰到废液缸


。
6.吸取两种以上的使用液时要注意更换吸管，防止交叉污染
。

准备室的设备
：
单蒸馏水蒸馏器、双蒸馏水蒸馏器
、酸缸、烤箱、高压锅



、储品柜（放置未消毒物品）、储品规（放置消毒过的物品）、包装台

。配液室的设备
：扭力天平和电子天平（称量药品）



、PH计（测量培养用液PH值）、磁力搅拌器（配置溶液室搅拌溶液）
。

培养室的设备

：
液氮罐
、储品柜（存放杂物）



、日光灯和紫外灯
、空气净化器系统
、低温冰箱（-80℃）、空调

、二氧化碳缸瓶

、边台（书写实验记录）
。必须放在无菌间的设备
：离心机（收集细胞）
、超净工作台
、倒置显微镜

、CO2孵箱（孵育培养物）



、水浴锅、三氧消毒杀菌机
、4℃冰箱（放置serum和培养用液）

。

无菌室的灭菌
：
1.定期打扫无菌室

：每周打扫一次，先用自来水拖地
、擦桌子、超净工作台等，然后用3‰来苏尔或者新洁尔灭或者0.5％过氧乙酸擦拭





。
2.CO2孵箱（培养箱）灭菌







：先用3‰新洁尔灭擦拭，然后用75％酒精擦拭或者0.5％过氧乙酸
，再用紫外灯照射
3.实验前灭菌：打开紫外灯
、三氧杀菌机
、空气净化器系统各20-30分钟
4.实验后灭菌
：用75％酒精（3‰新洁尔灭）擦拭超净台
、边台、倒置显微镜的载物台。