细胞生长缓慢的常见原因:

    (1)培养基可能缺乏细胞生长所需的某种因子


。

    通常情况下，当小伙伴购买细胞，并没有按照ATCC或国内细胞库推荐的方法制备培养基
，使用实验室兄弟姐妹使用的培养基来培养细胞。解决方法一般是按照推荐的方法制备培养基，或直接购买培养细胞的培养基。(B)细菌
、支原体、真菌等污染:虽然培养基中通常添加双抗体(青霉素和链霉素)



，但如果无菌操作观念不强，仍有可能造成污染。处理方法:如果有冷冻细胞，可以丢弃污染细胞

。当然

，丢弃并不是随意的，扔进垃圾桶
。应按照实验室生物安全规定进行




。然后复苏培养物


，建议培养箱完全消毒。

如果不冷冻
，而且这种细胞非常珍贵

，常用的治疗方法是药物治疗:细菌污染加5-10倍的抗生素;真菌污染加抗真菌药物;支原体污染再加上抗支原体药物
，具体药物可以咨询技术支持
，他们会更加专业
。

    (C)许多细胞的生长依赖于密度

。如果传代后细胞密度过小，也会影响细胞生长。这段时间没有什么特别好的

，就是更换液体





。如果细胞培养瓶为T75
，则可以消化、离心、复苏
，然后接种到T25瓶中
。

    (4)冷冻细胞中添加DMSO(二甲基亚砜)的量不正确，没有逐渐梯度冷却。下一次恢复后的细胞总是坏的
。处理方法:按推荐的冷冻保存方法制备冷冻液



。部分细胞适合10% DMSO，部分细胞适合5% DMSO;严格遵循渐变冷却的原则

，细胞恢复后迅速解冻。

    (5)换液间隔时间太长
。一些小伙伴真的把细胞“佛”系生长。当他们想到它的时候，才会换下液体

，相信一个句子

。“你已经是一个成熟的细胞了。你应该学会养活自己

，成长”

。在这种情况下

，细胞培养瓶中积累了大量的细胞代谢废物，影响细胞活性


。推荐:勤奋点

    (6)细胞的“消化”时间不宜过长

，减少对细胞的损伤;此外

，EDTA一般添加到胰腺酶中




，螯合钙离子，影响细胞粘附。治疗方法:控制细胞“消化”时间，尽量去除干净的胰蛋白酶和EDTA。

    PH值:细胞需要在一定的PH值下生长，这个小朋友知道




。但是很多时候PH值是EBET易博忽略的东西，这也是想强调的一点

。随着使用时间的增加，EBET易博使用的介质可能会慢慢变成碱性!(当然

，它也可能变酸，但改变碱是常见的)
。一般来说

，过碱的培养基会影响细胞的生长。治疗:简单的方法就是更换新鲜的培养基!当然
，如果你有时间和条件




，你可以调整介质的pH值





。