胎牛血清通常在细胞培养中作为基础生长培养基的添加剂，在细胞培养中

，血清供应了丰富的高分子蛋白


，低分子量营养物，疏水载体蛋白和其他体外细胞生长必要的成分如激素和粘附因子

。同时，胎牛血清可以增加培养基的缓冲能力或中和有毒成分

，起到保护细胞的作用
。在细胞培养过程中是否选择添加血清




，主要根据基础培养基化学成分，培养细胞的类型和培养体系而定。今天给大家分享的是牛血清实验中常见的问题解析！搬起小板凳快来围观吧

！

血清实验中常见的问题解析：

一、 如何储存和解冻血清才不会使产品质量受损
？

将血清从冷冻箱取出后
，先置于2～8℃冰箱使之融解，然后在室温下使之全融。但必须注意的是


，融解过程中必须规则地摇晃均匀
。

长时间储存在2-8℃时，血清中的各种蛋白和脂蛋白(如冷凝集素


、纤维蛋白原


、玻粘连蛋白等)可能聚集而形成沉淀或可见的混浊
。因此
，推荐在-20℃以下储存血清


，并避免反复冻融。

建议血清应保存在-2O℃。若存放于4℃时
，请勿超过一个月
。若一次无法用完一瓶

，建议无菌分装血清至恰当的灭菌容器内，再放回冷冻。

二




、血清中包含絮状沉淀，它们是什么，怎么处理




？

沉淀包含纤维蛋白和脂蛋白
。这是正常特性，不会影响产品性质
。要除去沉淀，离心血清(400g
，1-2分钟)或者简单的让其沉淀在瓶子底部，将血清小心的转移到另一个无菌瓶里(一般不建议采用过滤的方法除去沉淀，因为沉淀会堵塞滤膜而无法过滤)。大多情况轻轻摇动沉淀并加热至37℃就会再溶解

。所以，使用产品时要摇动并加热血清至37℃，沉淀会自然消失。

三、 培养基中添加了血清和抗生素后，可长期保存吗

？

一旦您在新鲜培养基中添加了血清和抗生素时，您应该在两到三周内使用它
。因为一些抗生素和血清中的基本成分在解冻后就开始降解。

四、 为什么要热灭活血清


？

加热可以灭活补体系统
。激活的补体参与溶解细胞事件
，刺激平滑肌收缩，细胞和血小板释放组胺，激活淋巴细胞和巨噬细胞。在免疫学 研究，培养ES细胞、平滑肌细胞时



，推荐使用热灭活血清。

五、 有必要做热灭活吗




？

实验显示
，经过正确处理的热灭活血清，对大多数的细胞而言是不需要的。经此处理过的血清对细胞的生长只有微小的促进
，或完全没有任何作用

，甚至通常因为高温处理影响了血清的质量

，而造成细胞生长速率的降低
。

而经过热处理的血清，沉淀物的形成会显着的增多
，这些沉淀物在倒置显微镜下观察，像是“小黑点”

，常常会让研究者误以为是血清遭受污染
，而把血清放在37℃环境中，又会使此沉淀物更增多，使研究者误认为是微生物 的分裂扩增
。

非必须，可以不需要做热处理这一步
。不但节省时间
，更确保血清的质量!

六
、细胞培养 中出现黑点是污染吗

？如何处理？

一旦您在细胞培养的过程中发现有黑点生成，首先
，要肉眼观察培养基是否混浊，然后，在镜下观察培养细胞生长的状态
，黑点是否游动。如果细胞被污染


，微生物则会大量繁殖
，培养基就会迅速变黄



、变混浊。污染包括细菌污染、支原体污染等
。

七



、小牛血清和胎牛血清有何区别与注意事项？

来源不同：胎牛血清(Fetal Bovine Serum ,FBS) 是在屠宰怀孕母牛的时候,通过心脏穿刺采血获取的胎牛的血清，新生牛(小牛)血清(Calf serum, CS)采自出生10至14 天的小牛。

组份与比例不同
：两者所含的促细胞生长因子、促贴附因子

、激素及其他活性物质等组份与比例不同


，用途与用法不同：某些细胞必需胎牛血清才能生长
，而有些细胞只需小牛血清即可，使用浓度不同
，一般在5%-10%，有特殊要求的浓度在20%
。

血清保存和使用须注意

：血清应保存在-5℃至-20℃
，若存放在4℃不可超过一个月

。

解冻血清时
，应先将血清至于2-8℃冰箱，并经常摇匀使之溶解

，然后至室温放置使之升温，绝对不可将冷冻的血清直接放入37℃水浴或者温箱中，如放在37℃解冻，颜色加深，粘稠度也会增加
，血清在解冻和热灭活后
，应按用量分装并于-20℃保存

，避免反复冻融


。