1.切记，细胞培养基的储存条件是2-8℃。如果细胞培养基不小心被冻，您应该融化培养基并观察是否有沉淀产生

。如果没有沉淀产生

，培养基可以正常使用


，如果出现沉淀

，只能丢弃这些培养基
。

2.贮存在冰箱中的瓶口已开的培养基
，可能在放置几天后颜色变紫
。这主要是由于在暴露到周围的CO2水平时，碳酸氢钠导致了pH值的上升
。您可以在使用前松开瓶口，在CO2培养箱孵育培养基10-15min

，来校正溶液的pH值(确定松开瓶口以保证气体交换)
。

3.当在无血清培养基中添加抗生素时
，降低至少在有血清培养基中所使用浓度的50%


。血清蛋白会结合和灭活一些抗生素

。在无血清培养条件下

，抗生素不被灭活

，可能对于细胞达到毒性水平。

4.一旦您在新鲜培养基中添加了血清和抗生素时

，您应该在两到三周内使用它。因为一些抗生素和血清中的基本成分在解冻后就开始降解。

5.总之


，大部分添加物和试剂最多可以冻融3次，如果次数更多都会在包含蛋白的溶液引起一定水平的降解和沉淀
，将会影响它的性能

。

6.血清的热灭活在免疫分析时可以灭活补体系统。在免疫学研究
，培养ES细胞，昆虫细胞和平滑肌细胞时
，推荐使用热灭活血清。热灭活是以往公认的操作步骤
，并没有确凿的证据说明这样做是有益的


。相反
，对大部分细胞而言，GIBCO和HyClone都不推荐热灭活血清



。因为加热可能使血清中的沉淀增加，使您误以为污染
。

7.在进行传代培养时

，EBET易博强烈推荐进行台盼兰活性记数。研究者常常通过一个简单的稀释(1∶4或1∶2)进行传代，不进行活性检测，您可能接种比你认为的低得多的浓度的细胞



，这常常可能导致生长缓慢或培养物根本不生长





。

8.在订购的细胞到达后，应立即复苏，如果培养基还没有准备好，可将其放入液氮中
，尽快复苏。千万不能放置在-20或-80℃的冰箱内

。

9.细胞复苏往往是比较容易出问题的步骤
。请在订购细胞时就向供应商索取详细的复苏步骤
，并仔细阅读。有些供应商就不推荐在复苏时离心
，对此类细节
，应特别留意



。

如何避免血清中沉淀物的产生?

1. 解冻血清时
，请按照所建议的逐步解冻法(-20℃至4℃至室温)，若血清解冻时改变的温度太大(如-20℃至37℃)
，实验显示非常容易产生沉淀物

。并随时将之摇晃均匀

，使温度及成分均一
，减少沉淀的发生
。

2. 请勿将血清置于37℃太久



。若在37℃放置太久

，血清会变得混浊，同时血清中许多较不稳定的成分也会因此受到损害

，而影响血清的质量



。

3.血清的热灭活非常容易造成沉淀物的增多，若非必要，可以无须做此步骤








。

4.若必须做血清的热灭活

，请遵守56℃
，30min的原则，并且随时摇晃均匀
。温度过高，时间过久或摇晃不均匀，都会造成沉淀物的增多

。