小伙伴们可能经历过:不做实验时，细胞成长迅速;当做实验时



，自己的细胞似乎是安眠药
，昏昏欲睡

这个时候我该怎么办?为了让EBET易博的细胞茁壮成长，EBET易博自然要找到问题

，想个办法!

细胞生长缓慢的常见原因:

    (1)培养基可能缺乏细胞生长所需的某种因子


。

    通常情况下，当小伙伴购买细胞
，并没有按照ATCC或国内细胞库推荐的方法制备培养基，使用实验室兄弟姐妹使用的培养基来培养细胞



。解决方法一般是按照推荐的方法制备培养基
，或直接购买培养细胞的培养基

。(B)细菌、支原体
、真菌等污染:虽然培养基中通常添加双抗体(青霉素和链霉素)
，但如果无菌操作观念不强，仍有可能造成污染。处理方法:如果有冷冻细胞，可以丢弃污染细胞

。当然

，丢弃并不是随意的
，扔进垃圾桶
。应按照实验室生物安全规定进行
。然后复苏培养物
，建议培养箱完全消毒
。

如果不冷冻，而且这种细胞非常珍贵，常用的治疗方法是药物治疗:细菌污染加5-10倍的抗生素;真菌污染加抗真菌药物;支原体污染再加上抗支原体药物


，具体药物可以咨询技术支持
，他们会更加专业。

    (C)许多细胞的生长依赖于密度
。如果传代后细胞密度过小，也会影响细胞生长
。这段时间没有什么特别好的




，就是更换液体
。如果细胞培养瓶为T75
，则可以消化、离心、复苏，然后接种到T25瓶中

。

    (4)冷冻细胞中添加DMSO(二甲基亚砜)的量不正确，没有逐渐梯度冷却



。下一次恢复后的细胞总是坏的


。处理方法:按推荐的冷冻保存方法制备冷冻液

。部分细胞适合10% DMSO
，部分细胞适合5% DMSO;严格遵循渐变冷却的原则

，细胞恢复后迅速解冻
。

    (5)换液间隔时间太长




。一些小伙伴真的把细胞“佛”系生长。当他们想到它的时候
，才会换下液体

，相信一个句子
。“你已经是一个成熟的细胞了



。你应该学会养活自己


，成长”




。在这种情况下，细胞培养瓶中积累了大量的细胞代谢废物
，影响细胞活性。推荐:勤奋点

    (6)细胞的“消化”时间不宜过长，减少对细胞的损伤;此外，EDTA一般添加到胰腺酶中

，螯合钙离子

，影响细胞粘附。治疗方法:控制细胞“消化”时间，尽量去除干净的胰蛋白酶和EDTA。

    PH值:细胞需要在一定的PH值下生长

，这个小朋友知道

。但是很多时候PH值是EBET易博忽略的东西，这也是小秋今天想强调的一点。随着使用时间的增加
，EBET易博使用的介质可能会慢慢变成碱性!(当然

，它也可能变酸

，但改变碱是常见的)。一般来说

，过碱的培养基会影响细胞的生长


。治疗:最简单的方法就是更换新鲜的培养基!当然




，如果你有时间和条件，你可以调整介质的pH值。