货号

H099

种属

人

细胞来源

ATCC/中科院/协和医院等地引进

生长特性

贴壁  上皮细胞样

培养条件

培养基：DMEM90%+ FBS 10%（推荐HAKATA优等胎牛血清，货号:HN-FBS-50）

温度：37℃     气相：95%空气,5% CO2

传代

1. 用75%酒精喷洒整个培养瓶消毒，将其平躺置于培养箱中进行1-3小时的缓冲，.然后置于无菌操作台，打开瓶口，将旧培养基更换成5-6mL新鲜培养基(以T25培养瓶为例)并置于细胞培养箱中培养，根据细胞生长状况及培养基颜色变化对其进行换液或传代，每2至3天加入新鲜培养基（根据细胞密度）;

2. 通过添加新鲜培养基来维持培养。或者可以通过离心去除旧培养基，再加入新培养基并以5-10×10⁵个活细胞/mL的密度再悬浮进行培养。建议将细胞密度维持在5×10⁵个至1×10⁶个细胞/mL之间。

保存

冻存条件：70%完全培养基+20%FBS+10%DMSO

(备注：建议使用本公司的冷冻液（H-W-100），用4度保存的冷冻液直接重悬细胞，不能预热后使用。)

保存条件：液氮存储

供应限制

仅供研究之用

常见问题及解决方案

1.培养瓶有破裂，培养液有漏液：细胞极大可能会污染，所以EBET易博会及时安排帮老师解决。

2.收到细胞后尽快更换为含 10%血清的新鲜培养基，如因特殊情况需要继续使用原瓶培养基，请在原瓶培养基中额外添加 10%的血清（原瓶培养基的继续使用时间最长不宜超过 72 小时）

3.细胞漂浮：培养瓶不开封，瓶口酒精擦拭后平躺放置在培养箱。1-2小时后观察，如细胞大部分又贴回瓶底，表明细胞活力正常，剩余漂浮的细胞可以去掉，留8-10ml培养液培养观察，细胞生长至汇合度80%，进行消化传代；如细胞还是不贴壁，将细胞离心收集转到新培养瓶，原培养瓶加部分培养液继续培养，中间注意观察，EBET易博的技术人员会一直跟踪指导，直到问题解决。