一.  细胞特性

细胞名称
：A172细胞，人胶质母细胞瘤细胞

生长特性
：贴壁 上皮样

种      属：人

培养难度：★★

二． 培养条件

培养基：90%DMEM+10%FBS（推荐HAKATA优等胎牛血清
，货号:HN-FBS-500）

温度：37℃     气相：95%空气,5% CO2

三． 传代方式

1.用75%酒精喷洒整个培养瓶消毒

，将其平躺置于培养箱中进行1-3小时的缓冲





，.然后置于无菌操作台


，打开瓶口
，将其中的培养液去掉，再往其中加入5-6mL新鲜培养基(以T25培养瓶为例)并置于细胞培养箱中培养，根据细胞生长状况及培养基颜色变化对其进行换液以及传代，一般2到3天换一次液；

2.待细胞长满瓶底面积80%-90%

，需要对其进行传代
，传代比例为1:2到1:4



；

3.传代步骤：将0.25%胰酶-0.53 mM EDTA消化液置于37°预热
，倒掉培养瓶中的培养基，往培养瓶中加入3-5 ml PBS

，轻晃洗涤后弃去
。往瓶中加1-2 ml预热好的胰酶，置于37°孵育消化（第一次消化需时常取出置于显微镜下观察






，以显微镜下细胞触角回收变圆、轻拍瓶壁见细胞脱落为最佳消化时间

，记录最佳消化时间，以便于下次消化），消化好后加入3ml完全培养基终止消化。用移液枪轻轻吹打瓶壁上的细胞
，使之完全脱落，然后收集细胞悬液

，1200rpm离心3min

，弃上清


，加入完全培养基重悬细胞


，进行传代


。

四． 冻存条件

冻存条件


：80%完全培养基+10%FBS+10%DMSO

(*建议使用本公司无血清细胞冷冻液（H-W-100）
，用4度保存的冷冻液重悬细胞，直接冻存于-80°C
。)

长期存储：液氮

五． 供应限制

该产品仅供研究使用
。

发货方式

EBET易博采取两种形式的细胞发货方式

：

  1. 复苏发货

                  a. T25瓶活细胞发货

                  b. 血清重悬发货

  2. 冻存管发货(干冰发货)
 对于采取冻存管方式发货的客户
，为了保证可靠性EBET易博会多发一管细胞(共2管)
，干冰覆盖保温运输






。

复苏及冻存发货方式均为顺丰速运

，EBET易博会根据收货地址及温度差异采取不同的发货方式(T25/血清重悬/冻存/用户指定)








，并在发货前的3天内与您确认收货地址及配送方式

。

EBET易博生物论文基金奖励方法

奖励对象
：

使用HAKATA系列产品(HAKATA全系列

：血清、冻存液

、试剂

、细胞株等)培养细胞并在中文核心期刊杂志或SCI期刊杂志发表文章，且文章中材料和方法栏中标注我公司品牌名或公司名(英文：HAKATA或Shanghai Chuanqiu Biotechnology Co.,Ltd, China
，中文:HAKATA或EBET易博生物)

该奖励方案长期有效

，欢迎大家与EBET易博分享获得成果的喜悦
！

详情：https://www.082786.com/index.php?a=shows&catid=38&id=183