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cos-1非洲绿猴肾细胞
货号 :C007
价格  :¥1600.00
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细胞名称

cos-1 非洲绿猴肾细胞

货号

C007

种属

非洲绿猴

细胞来源

ATCC/中科院/协和医院等地引进

生长特性

贴壁 上皮细胞样

培养条件

培养基:90%DMEM+10%FBS(推荐HAKATA优等胎牛血清  ,货号:HN-FBS-50)

温度  :37℃     气相 :95%空气  ,5%二氧化碳

传代

1.75%酒精喷洒整个培养瓶消毒 ,将其平躺置于培养箱中进行1-3小时的缓冲 ,.然后置于无菌操作台  ,打开瓶口,将其中的培养液去掉  ,再往其中加入5-6mL新鲜培养基(T25培养瓶为例)并置于细胞培养箱中培养,根据细胞生长状况及培养基颜色变化对其进行换液以及传代  ,一般23天换一次液 ;

2.待细胞长至80%  ,需要对其进行传代   ,推荐传代比例为1:31:5   ;

3传代步骤 :将0.25%胰酶-0.53 mM EDTA消化液置于37°预热    ,倒掉培养瓶中的培养基      ,往培养瓶中加入3-5 ml PBS ,轻晃洗涤后弃去。往瓶中加1-2 ml预热好的胰酶 ,置于37°孵育消化(第一次消化需时常取出置于显微镜下观察,以显微镜下细胞触角回收变圆、轻拍瓶壁见细胞脱落为最佳消化时间    ,记录最佳消化时间 ,以便于下次消化) ,消化好后加入3ml完全培养基终止消化。用移液枪轻轻吹打瓶壁上的细胞,使之完全脱落      ,然后收集细胞悬液     ,125g离心3min ,弃上清    ,加入完全培养基重悬细胞 ,进行传代  。

保存

冻存条件:80%完全培养基+10%FBS+10%DMSO

(备注 :建议使用本公司的冷冻液(H-W-100),4度保存的冷冻液直接重悬细胞,不能预热后使用 。)

保存条件:液氮存储

供应限制

仅供研究之用

常见问题及解决方案

1.培养瓶有破裂 ,培养液有漏液 :细胞极大可能会污染     ,所以EBET易博会及时安排帮老师解决  。

2.收到细胞后尽快更换为新鲜培养基

3.细胞漂浮  :培养瓶不开封 ,瓶口酒精擦拭后平躺放置在培养箱。1-2小时后观察 ,如细胞大部分又贴回瓶底 ,表明细胞活力正常  ,剩余漂浮的细胞可以去掉,留8-10ml培养液培养观察,细胞生长至汇合度80%   ,进行消化传代;如细胞还是不贴壁,将细胞离心收集转到新培养瓶  ,原培养瓶加部分培养液继续培养 ,中间注意观察,EBET易博的技术人员会一直跟踪指导,直到问题解决   。

 


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