货号

M009

种属

小鼠

细胞来源

ATCC/中科院/协和医院等地引进

生长特性

贴壁

培养条件

培养基
：90%DMEM/F12+10%FBS

温度


：37℃     气相：95%空气，5%二氧化碳

传代

1.用75%酒精喷洒整个培养瓶消毒


，将其平躺置于培养箱中进行1-3小时的缓冲，.然后置于无菌操作台，打开瓶口，将其中的培养液去掉，再往其中加入5-6mL新鲜培养基并置于细胞培养箱中培养
，根据细胞生长状况及培养基颜色变化对其进行换液以及传代；

2.待细胞长满瓶底面积70-80%
，需要对其进行传代
，传代比例为1:3-1
：6；

3传代步骤




：将0.25%胰酶-0.53 mM EDTA消化液置于37℃预热
，倒掉培养瓶中的培养基，往培养瓶中加入3-5 ml PBS，轻晃洗涤后弃去

。往瓶中加1-2 ml预热好的胰酶，置于室温孵育消化（第一次消化需置于显微镜下观察，以显微镜下细胞触角回收变圆、轻拍瓶壁见细胞脱落为最佳消化时间

，记录最佳消化时间

，以便于下次消化）

，消化好后加入3ml完全培养基终止消化







。用移液枪轻轻吹打瓶壁上的细胞



，使之完全脱落，然后收集细胞悬液

，1000rpm离心3min
，弃上清，加入完全培养基重悬细胞
，进行传代

。

保存

冻存条件：70%完全培养基+20%FBS+10%DMSO

(备注
：建议使用本公司的冷冻液（H-W-100）
，用4度保存的冷冻液直接重悬细胞，不能预热后使用






。)

保存条件
：液氮存储

供应限制

仅供研究之用

常见问题及解决方案

1.培养瓶有破裂
，培养液有漏液
：细胞极大可能会污染

，所以EBET易博会及时安排帮老师解决

。

2.收到细胞后尽快更换为含 10%血清的新鲜培养基

，如因特殊情况需要继续使用原瓶培养基，请在原瓶培养基中额外添加 10%的血清（原瓶培养基的继续使用时间最长不宜超过 72 小时）

3.细胞漂浮
：培养瓶不开封
，瓶口酒精擦拭后平躺放置在培养箱。1-2小时后观察
，如细胞大部分又贴回瓶底



，表明细胞活力正常
，剩余漂浮的细胞可以去掉
，留8-10ml培养液培养观察


，细胞生长至汇合度80%




，进行消化传代

；如细胞还是不贴壁

，将细胞离心收集转到新培养瓶

，原培养瓶加部分培养液继续培养




，中间注意观察



，EBET易博的技术人员会一直跟踪指导





，直到问题解决
。

产品货号

CQ30090

种属/性别/年龄

小鼠

组织来源

鼠肺泡组织

生长特性

贴壁

生长培养基

90%DMEM/F12+10%FBS

细胞检测

不含细菌
、真菌

、支原体污染

培养条件

气相
：空气，95%
；  CO2
，5%     温度
：37℃

冻存条件

90%完全培养基+10%DMSO