货号

M026

种属

小鼠

细胞来源

ATCC/中科院/协和医院等地引进

生长特性

半贴壁 圆形

培养条件

培养基：DMEM+10%FBS (推荐HAKATA优等胎牛血清，货号:HN-FBS-500)

温度：37℃     气相：95%空气，5%二氧化碳

传代

1.用75%酒精喷洒整个培养瓶消毒，将其平躺置于培养箱中进行1-3小时的缓冲，.然后置于无菌操作台，打开瓶口，将其中的培养液去掉，再往其中加入5-6mL新鲜培养基并置于细胞培养箱中培养，根据细胞生长状况及培养基颜色变化对其进行换液以及传代；

2.待细胞长满瓶底面积80%，需要对其进行传代，传代比例为1:3至1：6；

3传代步骤：培养瓶静置，使细胞尽量贴壁，小心地去除旧培养基后，使用细胞刮将细胞刮下，再加入培养基重悬传代。或去掉旧培养基后，加入新鲜培养基对细胞进行吹打将其从瓶底分离。吹打次数不宜过多，以免造成细胞损伤。若悬浮细胞较多，可直接用旧培养基吹打细胞，吹打完成后吸出培养基，1000r/min离心5min，去上清后加入新鲜培养基重悬传代。

保存

冻存条件：70%完全培养基+20%FBS+10%DMSO

(备注：建议使用本公司的冷冻液（H-W-100），用4度保存的冷冻液直接重悬细胞，不能预热后使用。)

保存条件：液氮存储

供应限制

仅供研究之用

常见问题及解决方案

1.培养瓶有破裂，培养液有漏液：细胞极大可能会污染，所以EBET易博会及时安排帮老师解决。

2.收到细胞后尽快更换为新鲜培养基

3.细胞漂浮：培养瓶不开封，瓶口酒精擦拭后平躺放置在培养箱。1-2小时后观察，如细胞大部分又贴回瓶底，表明细胞活力正常，剩余漂浮的细胞可以去掉，留8-10ml培养液培养观察，细胞生长至汇合度80%，进行消化传代；如细胞还是不贴壁，将细胞离心收集转到新培养瓶，原培养瓶加部分培养液继续培养，中间注意观察，EBET易博的技术人员会一直跟踪指导，直到问题解决。